2024-12-03 01:07:05
改良R2A瓊脂(ModifiedR2Amedium)是一種應(yīng)用的低營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基,用于微生物的分離、計(jì)數(shù)和鑒定,特別是在水質(zhì)檢測(cè)中用于測(cè)定細(xì)菌總數(shù)。以下是改良R2A瓊脂的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和配制方法:1.**成分**:-酵母浸出粉-蛋白胨-酪蛋白水解物-葡萄糖-可溶性淀粉-磷酸氫二鉀-無(wú)水硫酸鎂-酸鈉-瓊脂2.**pH值**:通常調(diào)節(jié)至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:-主要用于純化水中菌落總數(shù)的測(cè)定。-適用于EP(歐洲藥典)、USP(美國(guó)藥典)、ChP(中國(guó)藥典)標(biāo)準(zhǔn)。4.**配制方法**:-稱取適量的培養(yǎng)基粉末,加入到蒸餾水或去離子水中。-加熱煮沸以幫助成分溶解。-調(diào)節(jié)pH值至適宜范圍。-進(jìn)行高壓滅菌,通常是121℃滅菌15分鐘。5.**保存條件**:通常在2-8°C下保存。6.**注意事項(xiàng)**:-在稱量和操作過(guò)程中應(yīng)注意無(wú)菌操作,避免微生物污染。-使用后應(yīng)立即旋緊瓶蓋,防止吸潮。7.**應(yīng)用**:-在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、食品檢測(cè)和環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域有廣的應(yīng)用。8.**質(zhì)控結(jié)果**:質(zhì)控菌株接種后于30-35℃需氧培養(yǎng)48-120小時(shí),用于評(píng)估培養(yǎng)基的性能。改良R2A瓊脂因其營(yíng)養(yǎng)豐富、操作簡(jiǎn)便和應(yīng)用廣,成為實(shí)驗(yàn)室中常用的培養(yǎng)基之一。血瓊脂基礎(chǔ)2號(hào)可用于觀察細(xì)菌生長(zhǎng)引起的溶血現(xiàn)象,這有助于細(xì)菌的鑒定。Ashby培養(yǎng)皿
富集培養(yǎng)基是一種特殊的培養(yǎng)基,它的設(shè)計(jì)旨在促進(jìn)某類特定微生物的生長(zhǎng)和繁殖,同時(shí)抑制或阻止其他微生物的生長(zhǎng)。這種培養(yǎng)基常用于從環(huán)境樣品中分離和富集目標(biāo)微生物,如細(xì)菌、或古菌等。以下是富集培養(yǎng)基的一些關(guān)鍵特點(diǎn)和應(yīng)用:1.**特定營(yíng)養(yǎng)添加**:富集培養(yǎng)基通常包含有利于目標(biāo)微生物生長(zhǎng)的特定營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如有機(jī)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)物、酸堿度調(diào)節(jié)劑、抗生物質(zhì)等。2.**選擇性抑制**:通過(guò)添加某些化學(xué)物質(zhì),如染色劑、結(jié)構(gòu)類似物和食鹽等,抑制非目標(biāo)微生物的生長(zhǎng)。3.**環(huán)境條件控制**:根據(jù)目標(biāo)微生物對(duì)pH、溫度、氧氣需求等條件的特殊要求,調(diào)節(jié)培養(yǎng)條件以促進(jìn)其生長(zhǎng)。4.**促進(jìn)復(fù)蘇**:某些情況下,富集培養(yǎng)基可以用來(lái)促進(jìn)處于休眠狀態(tài)的微生物復(fù)蘇,從而提高分離效率。5.**應(yīng)用廣**:富集培養(yǎng)基在微生物學(xué)研究、醫(yī)學(xué)診斷、環(huán)境保護(hù)、食品檢測(cè)等領(lǐng)域有廣泛應(yīng)用。6.**操作過(guò)程**:包括樣本采集、稀釋、選擇適當(dāng)?shù)母患囵B(yǎng)基和培養(yǎng)條件、以及后續(xù)的分離和鑒定。7.**連續(xù)富集培養(yǎng)**:有時(shí)需要通過(guò)連續(xù)轉(zhuǎn)移培養(yǎng)來(lái)逐步提高目標(biāo)微生物的比例,尤其是在處理難以培養(yǎng)的微生物時(shí)。Pfizer腸球菌選擇性瓊脂平板普通肉湯培養(yǎng)基通常由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)、氯化鈉和水組成,這些成分為細(xì)菌提供必需的碳源等。
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值對(duì)李斯特氏菌的生長(zhǎng)有影響。李斯特氏菌的適生長(zhǎng)pH值為7.0±0.2(25℃),這與牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)的pH值相匹配。在這個(gè)pH值下,李斯特氏菌能夠良好地生長(zhǎng)并表現(xiàn)出其特有的生物學(xué)特性,如β-溶血和七葉苷的水解。pH值對(duì)微生物生長(zhǎng)至關(guān)重要,因?yàn)樗梢杂绊懀?.**酶活性**:許多微生物的代謝酶在特定的pH值范圍內(nèi)活性高。2.**細(xì)胞膜功能**:pH值的變化可能會(huì)干擾細(xì)胞膜的完整性和功能,影響營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收和廢物的排出。3.**代謝途徑**:pH值的變化可能會(huì)改變微生物的代謝途徑,從而影響其生長(zhǎng)和繁殖。牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)中的pH值是通過(guò)添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分來(lái)維持的,這些成分不僅提供碳氮源、維生素和生長(zhǎng)因子,還有助于維持培養(yǎng)基的pH值。如果pH值偏離了范圍,可能會(huì)抑制李斯特氏菌的生長(zhǎng),或者導(dǎo)致其他非目標(biāo)微生物過(guò)度生長(zhǎng),影響結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此,為了確保牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)能夠準(zhǔn)確地分離和培養(yǎng)李斯特氏菌,實(shí)驗(yàn)室人員需要仔細(xì)控制和監(jiān)測(cè)培養(yǎng)基的pH值。
TGY肉湯培養(yǎng)基(TryptoneGlucoseYeastBrothMedium)是一種用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基,特別適合于芽孢菌的培養(yǎng)。以下是它的一些主要特點(diǎn)和用途:1.**配方成分**:TGY肉湯培養(yǎng)基的主要成分包括胰蛋白胨(或胰酪蛋白胨)、酵母浸粉、葡萄糖和瓊脂。胰蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、維生素和礦物質(zhì),葡萄糖作為碳源和能源,瓊脂用于固化培養(yǎng)基。2.**pH值**:該培養(yǎng)基的pH值通??刂圃?.0至7.5之間,為微生物提供適宜的生長(zhǎng)環(huán)境。3.**用途**:TGY肉湯培養(yǎng)基主要用于細(xì)菌的培養(yǎng),特別是對(duì)于需要營(yíng)養(yǎng)豐富環(huán)境的細(xì)菌,如芽孢桿菌屬的細(xì)菌。它也適用于細(xì)菌總數(shù)的測(cè)定和微生物的增菌培養(yǎng)。4.**配制方法**:通常需要稱取一定量的培養(yǎng)基粉末,加入蒸餾水或去離子水中,加熱煮沸至完全溶解,然后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,分裝于無(wú)菌容器中備用。5.**質(zhì)量控制**:通過(guò)接種質(zhì)控菌株,如大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌和枯草芽孢桿菌等,來(lái)驗(yàn)證培養(yǎng)基的性能。這些菌株在TGY肉湯培養(yǎng)基上應(yīng)表現(xiàn)出良好的生長(zhǎng)特性。6.**儲(chǔ)存條件**:干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,室溫保存。制備好的培養(yǎng)基應(yīng)避免光線直接照射,并保存于2-8℃。哥倫比亞肉湯的pH值通常控制在7.3至7.5之間,為微生物生長(zhǎng)提供適宜的酸堿環(huán)境 。
牛津瓊脂(OXA)基礎(chǔ)是一種用于分離培養(yǎng)李斯特氏菌(Listeriamonocytogenes)的選擇性培養(yǎng)基。它的成分包括特殊蛋白胨、可溶性淀粉、氯化鈉、七葉苷、檸檬酸鐵銨、氯化鋰和瓊脂等,pH值控制在7.0±0.2(25℃)。**特點(diǎn)**:1.**選擇性**:含有氯化鋰和抗生物質(zhì)添加劑(如多粘菌素E、放線菌酮、吖啶黃素、頭孢雙硫唑甲氧、磷霉素),這些成分能夠抑制革蘭氏陰性菌和大多數(shù)革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),特別是非李斯特氏菌。2.**應(yīng)用**:主要用于食品、水和污水樣本中李斯特氏菌的選擇性分離培養(yǎng),符合ISO和SN標(biāo)準(zhǔn)。3.**配制方法**:通常稱取5.85g的OXA基礎(chǔ)粉末,溶解在100mL蒸餾水中,高壓滅菌15分鐘后冷卻至50℃,再加入配套的添加劑,混勻后傾入無(wú)菌平皿備用。4.**結(jié)果觀察**:李斯特氏菌在OXA培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí),會(huì)形成黑色菌落,并且菌落周圍可能有黑色環(huán)。牛津瓊脂基礎(chǔ)因其高選擇性和特異性,是檢測(cè)食品和水樣本中李斯特氏菌污染的重要工具。某些細(xì)菌能產(chǎn)生尿素酶,將尿素分解產(chǎn)生氨,使培養(yǎng)基變?yōu)閴A性,酚紅指示劑在pH升高時(shí)變色(通常為粉紅色)。EF-18瓊脂預(yù)裝培養(yǎng)皿
TGC液體培養(yǎng)基需要進(jìn)行高壓滅菌,以確保無(wú)菌。常用的滅菌方法包括加熱滅菌、過(guò)濾除菌、及化學(xué)試劑滅菌等。Ashby培養(yǎng)皿
芽孢桿菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)是一種專為芽孢桿菌屬細(xì)菌設(shè)計(jì)的微生物培養(yǎng)基,具有以下特點(diǎn):1.**營(yíng)養(yǎng)成分**:通常包含碳源、氮源以及促進(jìn)芽孢形成的必需微量元素。例如,葡萄糖作為碳源,硫酸銨或酵母提取物作為氮源。2.**pH值**:培養(yǎng)基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃),以保證細(xì)菌的良好生長(zhǎng)。3.**配方**:一個(gè)典型的芽孢桿菌培養(yǎng)基配方可能包含葡萄糖、磷酸鈣、硫酸銨、氯化鉀、七水硫酸鎂、硫酸錳、硫酸亞鐵和酵母提取物等成分。4.**制備方法**:首先稱取培養(yǎng)基粉末,加熱溶解于蒸餾水中,分裝后進(jìn)行高壓滅菌。滅菌后,冷卻至適當(dāng)溫度,接種菌種,并在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一定時(shí)間。5.**應(yīng)用**:主要用于芽孢桿菌的平板計(jì)數(shù),可以用于檢測(cè)和分離芽孢桿菌,包括枯草芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等。6.**注意事項(xiàng)**:由于培養(yǎng)基中含有不溶性磷酸鈣,滅菌后可能會(huì)有白色沉淀,因此在倒平板前需要充分搖勻培養(yǎng)基,以確保磷酸鈣均勻分布。7.**質(zhì)量控制**:接種質(zhì)控菌株后,應(yīng)在36℃±1℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72小時(shí),以驗(yàn)證培養(yǎng)基的性能和菌株的生長(zhǎng)情況。Ashby培養(yǎng)皿