2024-12-24 07:00:45
本實驗技術(shù)要點: **細胞比較好經(jīng)過饑餓處理,并且小室上下培養(yǎng)基的FBS有濃度差,以保證細胞可以穿透基質(zhì)膠。鋪細胞要均勻,濾膜底部不能產(chǎn)生氣泡,否則會導(dǎo)致細胞染色不均勻,或者局部細胞無法穿透。根據(jù)細胞類型選擇合適的膜孔徑和膜類型。PET膜兼容***,適合絕大多數(shù)種類的細胞。侵襲實驗的細胞密度比較大,一般在1 0 6cells/cm2左右,不同**細胞的接種密度、培養(yǎng)時間不同,需要參考文獻和實驗摸索。細胞太少,遷移不過去;細胞太多,可能導(dǎo)致正常組和實驗組無差異。哪家Transwell小室是有正規(guī)授權(quán)的?上海干細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)咨詢報價
主要優(yōu)點 ?易掰耳片設(shè)計便于觀察前從玻片上去除細胞培養(yǎng)小室,不需要特殊工具輔助,不會留下膠水或襯墊殘余物 ?聚丙烯培養(yǎng)小室耐受細胞固定液及染料,省去了觀察分析時提前去除培養(yǎng)小室造成的不使 ?可堆疊放置,節(jié)省寶貴操作臺面 ?方便細胞觀察,易于采集相關(guān)數(shù)據(jù)圖像 Millicell? ERS-2電阻儀 Millicell? ERS-2電阻儀是測量細胞膜電位的可靠設(shè)備,常被用來測定培養(yǎng)的上皮細胞的電阻或跨上皮細胞電阻(TEER)o ERS-2采用交流電(AC)定量檢測單層的健康狀態(tài)和細胞融合度。上海干細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)咨詢報價哪家血清是有正規(guī)授權(quán)的?
Millicell? ***培養(yǎng)型站立式培養(yǎng)小室 ? 獲得活性更高的培養(yǎng)細胞和組織,特別推薦用于體外移植物的立體培養(yǎng)和長期組織結(jié)構(gòu)研究 ? 較薄且更低的側(cè)壁,使其更好地適合標準培養(yǎng)皿尺寸,操作也更方便 ? Biopore?(PTFE)膜透氧性及透光性也非常出色,有助于提高細胞的存活力,**長超過40天 膜的類型及其特點 Biopore? 親水PTFE 膜 (聚四氟乙烯),CM 透氧透光性好,3D組織培養(yǎng)和觀察優(yōu)先 膜厚50μm,只0.4μm一種規(guī)格,需包被ECM。透明性很好,熒光背景低,蛋白吸附低,適合細胞顯微觀察。透氧性好,**適合用于組織***的長時間培養(yǎng)和觀察。有站立式和***培養(yǎng)型Millicell?產(chǎn)品形式。
主要優(yōu)點 ●1小時形成穩(wěn)定的線性濃度梯度并至少維持48小時 ●區(qū)分趨化性與隨機運動 ●多參數(shù)分析更利于機理研究 ●對慢速和快速遷移細胞都可以光學(xué)成像 ●可平行分析三種趨化物質(zhì),提高實驗通量和分析能力 ●即買即用,無需其它配件 AXIS?神經(jīng)軸突分離裝置 AXIS”平臺是默克密理博公司**技術(shù)的神經(jīng)突生長研究工具。這個基于玻片的微流小窒系統(tǒng)可以培養(yǎng)神經(jīng)細胞,并可在該系統(tǒng)中可控地加入生長因子,毒性物質(zhì)及其它試劑。神經(jīng)突的生長被限制在狹窄、平行的通道中,可以用顯微鏡方便地觀察神經(jīng)突生長與否。上海益啟生物添加劑訂購方便。
PET膜(聚酯)* 用于貼壁細胞的生長,無需胞外基質(zhì) 這種蝕刻的薄膜式半透明的或者在光學(xué)顯微鏡下是透明的,所以可以對細胞單層提供更好的細胞可視性和監(jiān)測。經(jīng)組織培養(yǎng)基處理以促進細胞黏附性和生長 *這些膜均為親水性膜 多孔插入式細胞培養(yǎng)板 無菌、即用的多孔插入式細胞培養(yǎng)板目前有24孔和 96孔兩種。獨特的設(shè)計,例如頂部輔助和淚珠狀的 孔形,使Merck Millipore的板相比常規(guī)的多孔插入式 細胞培養(yǎng)板使用更加方便且重復(fù)性**提高。 頂部加樣保護細胞單層細胞檢測試劑盒上海授權(quán)代理商。黃浦區(qū)添加劑細胞培養(yǎng)規(guī)格
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取上述200μL細胞液加入小室,下室(培養(yǎng)板)加入900L含有10% FBS的培養(yǎng)基。不同規(guī)格的小室和培養(yǎng)板所加的體積不同,具體參考Millicell?產(chǎn)品說明書。37°C孵育24至72小時,依據(jù)**細胞類型而定。孵育結(jié)束,小心取出細胞小室,吸掉小室上層培養(yǎng)液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%結(jié)晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后進行第8步或者第9步。PBS清洗兩次以去除多余的染料,立即用棉簽擦去濾膜上層的細胞,自然靜置風(fēng)干。顯微鏡下觀察濾膜下層的細胞,隨機選取不同的視野計數(shù)并算平均值。結(jié)晶紫溶解濾膜下層細胞,然后用33%醋酸脫色,將結(jié)晶紫完全洗脫下來,洗脫液可在酶標儀上570nm讀取OD值。這種方法可以避免視野下細胞穿透不均勻帶來的誤差。上海干細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)咨詢報價